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nssb.huajx.com摘要：目的建立参茸胶囊中人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的含量测定方法。方法采用液相色谱法，色谱柱为Kromasil 5μmC18柱（4.6mm×200mm，5μm），流动相为0.05％磷酸-乙腈（80：20），流速为1.Om1/min，检测波长为203nm。结果人参皂苷Rgl进样量在0.990～6.600μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0.9998；人参皂苷Re进样量在0.816～5.440μg的范围内与峰面积也呈良好的线性关系，相关系数为0.9998。平均回收率分别为Rgl=98.51％、Re=98.50％；RSDRgl=0.82％，RSDRe=1.07％。结论本方法简便快速，分离度好，结果准确可靠。
关键词：参茸胶囊；人参皂苷Rgl、人参皂苷Re；液相色谱法；药物研究
Determination of Ginsenoside in ShenrongCapsule by HPLC
Song Xiao Cui Chunli
Abstract：Objective To determine Ginsenosidein Shenrong Capsule by HPLC．Methods Samples were purifled by C18column．HPLC comumn was Dikma Diamonsil Cl8（4.6mm×200mm，5μm），phase was 0.05％phosphate-Acetonitrile（80：20），flow rate was 1.0m1/min and detection wavelength was 203nm．Results
The calibration curve was linear in the range of 0.990～6.600μg forGinsenoside Rgl（r=0.9998）；The calibration curve was linear in therange of 0.816～5.440μg for Ginsenoside Re（r=0.9998）too．The averagerecovery were Rgl：98.51％ 、Re=98.50％ ．RSD were 0.82％ and 1.07％．Conclusion：The method with good separation isconwenient，rapid，accurate and reliable．
Key words：Shenmng Capsule；GinsenosideRgl、Ginsenoside Re：HPLC
参茸胶囊由生晒参、鹿茸、狗肾等五味中药组成。具有益气壮阳的功效。方中君药生晒参主要含有人参皂苷类成分，还含有挥发性成分，有机酸及酯，甾醇及苷，蛋白质，酶类，维生素类，无机元素，木质素，糖类等成分。对于人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的含量测定研究，近年来主要有分光光度法、薄层扫描法和液相色谱法，参考药典中人参药材的含量测定方法，zui终采用液相色谱法建立了适合本制剂的含量测定方法。该法灵敏、专属强、简便、重现性良好。
1．仪器与试药
1．1仪器 高效/液相色谱仪/（美国Waters公司，配Waters600泵，Waters 2487双波长检测器）。
1．2试药参茸胶囊由宁夏自治区银川紫金花药业提供（批号分别为：040218、040222、040226），人参皂苷Rgl、人参皂苷Re（中国药品生物制品鉴定所，批号分别为：703—200221、754—200214）；生晒参药材为市购。3批样品为自制。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
2．方法与结果
2．1色谱条件
色谱柱为Kromasil ODSC18（5μm，4.6mm×200ram）；流动相：0.05％磷酸-乙腈（80：20）；检测波长：203nm；柱温：室温；流速：lml／min；进样20μl。样品中人参皂苷与其它组分均能达到基线分离，阴性对照不产生干扰。
2．2线性范围
精密称取人参皂苷Rgl对照品3.30mg与人参皂苷Re对照品5.44mg，加甲醇分别制备成每lml含人参皂苷Rgl0.30mg，每lml含人参皂苷Re0.50mg的溶液，作为对照品溶液。分别精密吸取人参皂苷Rgl、人参皂苷Re对照品溶液3、5、10、15、20μl，按上述色谱条件，注入液相色谱仪，记录峰面积。
分别以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re面积对进样量（μg）回归，得人参皂苷Rg1回归方程A=15108.61+108022.52C，人参皂苷Re回归方程，A=14836.39+427474.62C，相关系数为rRgl=rRe=0.9998，人参皂苷在RglO.990-6.600μg之间和人参皂苷Re在0.816-5.440μg之间线性范围良好。
2．3精密度试验
精密吸取供试品溶液（批号：040218）20μl，连续进样5次，人参皂苷RSDRg1=0.58％、人参皂苷RSD Re=0.95％。
2．4重复性试验
按拟定的含量测定方法，对同一批号样品（批号：040218）分别制成供试品溶液，测得峰面积并计算，人参皂苷Rg1含量分别为：0.0885mg/粒，0.0887mg/粒，0.0897 mg/粒，0.0879 mg/粒，0.0886mg/粒，RSD为0.75％。人参皂苷Re含量分别为：0.0500mg/粒，0.0511mg/粒，0.0517mg/粒，0.0496mg/粒，0.0500mg/粒，RSD为1.75％ 。
2．5稳定性试验
取供试品（批号：040218），按供试品制备方法制备样品，分别于0h、4h及8h，进样20μl，结果表明样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re峰值在8h内稳定，RSDRg1=2.65％ 、RSDRe=1.16％ 。
2．6回收率试验采用加样回收法，取已知含量的生晒参复方制剂，分别加人参皂苷对照品，按供试品制备方法操作，同样色谱条件测定，计算回收率。结果表明，本方法回收率良好。
2．7样品测定
取本品内容物适量，称取7g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿40ml，加热回流4小时，弃取氯仿液，药渣挥去氯仿，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，精密加入水饱和正丁醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用上述水饱和正丁醇补充减失的重量摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。取三批供试品，按前述色谱条件测定。
经过三批含量测定结果及整个含量测定研究过程，考虑到药材的含量及其它影响因素，暂定本品含生晒参以人参皂苷Rgl（c42H72O14）、人参皂苷Re（C48H82O18）总量计，每粒不得少于0.0500mg。
3．讨论
3．1色谱条件选择：利用本法测定生晒参中人参皂苷时，流动相比例尤为重要。不能一味缩短其保留时间，而改变分离效果。当流动相为0.05％磷酸-乙腈（75：25）时，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re容易重合，很容易将两者当成一个组分。
3．2不同制样方法选择：先后采用水饱和正丁醇直接超声处理法、先用氯仿回流脱脂，再正丁醇直接超声处理法，以及先用氯仿回流脱脂，再正丁醇直接超声处理，再上大孔树脂洗脱法。结果表明：含量zui高者为本制样法。从方法学研究的结果进一步说明，该方法是科学可行的。
参考文献：
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