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nssb.huajx.com摘要：目的建立复方*剂中红景天苷的含量测定方法。方法：采用Kromasil Cl8色谱柱（4.6mm×200mm，5μm），以水-乙腈-磷酸（V：V：V=93.0：7.O：0.2）为流动相，流速为0.90mL/min；柱温为40℃，检测波长为223nm，进样15μL外标法计算含量。结果红景天苷在12～60mg/L内峰面积与对照品的质量浓度呈良好线性关系，其回归方程为Y=12846ρ+7656，r=0.9998，平均回收率为96.7％，RSD为1.2％（n=6）。结论方法简便、准确、重现性好，为复方*剂的质量控制提供一定依据。
关键词：复方*剂；红景天苷；反相液相色谱法
复方*剂由红景天、沙棘等中药组成，具有益气养阴的功效。用于气阴不足，淤血阳滞所引起的头晕、头痛、心悸、气喘、乏力，缺氧引起的红细胞增多症。国内外研究表明，红景天具有抗缺氧、抗疲劳、抗辐射、抗衰老及增强脑力、体力机能等方面的特殊功效?。红景天苷（salidroside）是红景天的主要活性成分之一，作者通过RP-HPLC法测定复方*剂中红景天苷的含量。方法简便、准确、重现性好，为有效控制产品质量提供一定依据。
1 仪器与试药
日本岛津LC-10A液相色谱仪/：LC-10AT*、SPD-10A紫外可见检测器/；DL-180超声仪（浙江省向山县石蒲海天电子仪器厂）。甲醇（色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂），乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂），纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司），其他试剂均为分析纯。红景天药材由沈阳中药饮片厂提供（出膏率为36.6％，红景天苷含量0.429％），经沈阳药科大学药用植物教研室鉴定，拉丁名为Rhodiolacrenulata。红景天苷对照品（中国药品生物制品检定所），复方*剂（自制）。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
色谱柱：Kromasil C18柱（4.6 mm ×200mm，5μm）；流动相：水．乙腈．磷酸（V：V：V=93.0：7.0：0.2）；流速：0.90Ml/min；检测波长：223nm；柱温：40℃；进样量：15μL。
2．2 色谱系统适用性试验
在“2．1”条色谱条件下，红景天苷与其他峰可*分离，分离度为3.0，理论板数以红景天苷计为3375。
2．3 对照品与供试品溶液的配制
对照品溶液的制备：取红景天苷对照品约5.0mg,精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇溶解制成每mL约含0.2mg红景天苷的溶液。供试品溶液的制备：取复方*剂10片，精密称定，求得平均片重。将上述10片片剂研细，取片剂粉末约80mg，精密称定，置10mL量瓶中，加甲醇，超声15min溶解后，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，放置，取上清液经微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液备用。
阴性对照液的制备：按处方比例称取红景天外其他组分及辅料的粉末，按供试品溶液制备方法制备即得。
2．4 阴性液干扰试验
精密吸取供试品溶液、阴性对照液和对照品溶液各15μL注入液相色谱仪中，由色谱图可知，在与对照品色谱峰保留时间相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰出现；而阴性液在此峰位无吸收，对本品中红景天苷的测定无干扰。。
2．5 标准曲线的绘制法操作，分别进样15μL，测得红景天苷色谱峰面精密吸取上述对照品溶液0.6、1.2、1.8、
2.4、3.0mL，分别置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各取15μL注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定色谱峰面积，以对照品质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y=12846ρ+ 7656，r=0.9998。结果表明，红景天苷在12～60mg/L内峰面积与对照品的质量浓度呈良好线性关系。
2．6 精密度试验
精密吸取同一供试品溶液（第1批）15μL，连续进样6次，测得红景天苷色谱峰面积，RSD为0.26％。
2．7 重现性试验
精密称取供试品6份（第1批），按“2．3”条方法操作，分别进样15μL，测得红景天苷色谱峰面积，RSD为1.2％。
2．8 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液（第1批）15μL，室温放置，分别于0、2、4、8、12、24h按上述色谱条件进样，测定红景天苷色谱峰面积，计算RSD为0.27％。结果表明，供试品溶液中红景天苷在24h内稳定。
2．9 回收率试验
取已知含量的复方*剂样品粉末约40.0mg，6份，精密称定，加入一定量的红景天苷对照品。按“2．3”条方法配制样品，按“2．1”条色谱条件测定红景天苷的含量，计算回收率。
2．10 样品测定
取样品3批，按“2．3”条供试品溶液制备方法操作，以“2．1”条色谱条件测定，每批样品测定3次取平均值，按外标法计算每片中红景天苷的含量。
3 讨论
对于红景天苷检测波长的确定，多数文献报道都集中在223nm和276nm，作者对红景天苷的对照品溶液和阴性对照液在200～400nm内进行紫外扫描，认为检测波长为223nm较好。
实验过程中发现，流动相中的磷酸含量对红景天苷的保留时间影响较大。由于复方制剂中成份多而复杂，在红景天苷主峰后仍有许多吸收峰，如在27.05、36.06、44.18、64.77、79.37、85.20min处各有一个明显吸收峰，故供试品的色谱分析时间长达90min，因此，还需进一步研究样品的前处理工作，使分析方法更快捷。作者采用RP-HPLC法，测定复方*剂中红景天苷的含量，方法简便、准确、重现性好，为该制剂的质量控制提供理论依据。
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